Белковые тела (БТ) являются стабильными полимерами, которые в естественных условиях формируются определенными белками, отвечающими за сохранность зерен, внутри эндоплазматического ретикулума (ЭР). Белок негативного фактора вируса человеческого иммунодефицита, потенциальный антиген для разработки антивирусной вакцины, очень нестабилен при его введении в секреторные метаболические пути растений, вероятно, из-за возникающего дефекта складчатости ЭР-окружения.

Цель недавней работы итальянских ученых – способствовать образованию Nef-содержащих БТ в листьях растениях табака (Nicotiana tabacum) путем внедрения Nef-последовательности в N-концевой домен γ-зеина – белка, отвечающего за сохранность кукурузы, или зеолина - химерного белка, который эффективно формирует БТ и состоит из вакуолярного белка хранения фазеолина, вставленного в N-концевой участок γ-зеина. Результаты опытов показывают, что место связывания Nef и таких же участков γ-зеина, что и присутствующих в зеолине, подвергается разрушению системой ЭР-контроля. Соответственно, модифицированный зеолин, в котором природный фазеолин был замещен его измененной версией, которая, как известно, разрушается системой ЭР-контроля, также оказывается нестабильным в клетках растений.

Внедрение вместо этого Nef в целую последовательность зеолина способствует формированию БТ, которые можно обнаружить с помощью электронной микроскопии и субклеточного фракционирования, что ведет к зеолин-Nef-накоплению в количестве выше, чем 1% общего растворимого белка, и последовательно воспроизводится в независимых трансгенных растениях. Ученые делают заключение, что зеолин, а не его γ-зеиновая часть, осуществляет позитивный доминантный эффект над системой контроля ЭР.

Эти результаты дают представление об условиях, необходимых для формирования БТ и избегания его разрушения под действием системы контроля качества ЭР, и указывают направление в стратегии накопления чужеродного белка в растениях.

Перевод © gmo.ru, источник:  The human immunodeficiency virus antigen Nef forms protein bodies in leaves of transgenic tobacco when fused to zeolin, J Exp Bot, 2008,  59 (10), рр. 2815–2829.

Источник новости: gmo.ru